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dianas 7 (1) Fernández-Martín etal 2018 Diseño de un péptido mimético específico contra AKT como diana terapéutica para inhibir la transición epitelio-mesénquima (TEM) en cáncer de pulmón.

SECUAH 2018 > Fernández-Martín etal 2018

dianas | Vol 7 No 1 | 2018 | e201803

Diseño de un péptido mimético específico contra AKT como diana terapéutica para inhibir la transición epitelio-mesénquima (TEM) en cáncer de pulmón.

Universidad de Alcalá

a. begobiologa@gmail.com  b. paolapintohh@gmail.com  c. elenagutig@gmail.com 

III Congreso de Señalización Celular, SECUAH 2018.
20-22 de marzo, 2018. Universidad de Alcalá. Alcalá de Henares, Madrid. España.
Sesión

Cita: Fernández-Martín B, Pinto-Hernández P, González-Martínez L, Gutierrez-Galindo E (2018) Diseño de un péptido mimético específico contra AKT como diana terapéutica para inhibir la transición epitelio-mesénquima (TEM) en cáncer de pulmón. Actas del III Congreso de Señalización Celular, SECUAH 2018. 20-22 de marzo, 2018. Universidad de Alcalá. Alcalá de Henares, Madrid. España. Sesión. dianas 7 (1): e201803. ISSN 1886-8746 (electronic) journal.dianas.e201803. URI http://hdl.handle.net/10017/15181

Copyright: ©2018 Fernández-Martín B, Pinto-Hernández P, González-Martínez L, Gutierrez-Galindo E. Some rights reserved. Este es un artículo open-access distribuido bajo los términos de una licencia de Creative Commons Reconocimiento-NoComercial-SinObraDerivada 4.0 Internacional. http://creativecommons.org/licenses/by-nc-nd/4.0/

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dianas 7 (1) Matamoros-Recio etal 2018 Heteroaromatic azonia cations with application as DNA fluorescent probes

SECUAH 2018 > Matamoros-Recio etal 2018

dianas | Vol 7 No 1 | 2018 | e201803

Heteroaromatic azonia cations with application as DNA fluorescent probes

Universidad de Alcalá

alejandra-m-r@hotmail.es

III Congreso de Señalización Celular, SECUAH 2018.
20-22 de marzo, 2018. Universidad de Alcalá. Alcalá de Henares, Madrid. España.
Sesión

Resumen

The fluorimetric detection and visualization of biomacromolecules is a key technique in bioanalytical chemistry. Fluorescent probes whose emission intensity increases upon association with biomacromolecules such as DNA or proteins (“light-up probes”) are useful markers in genomics and proteomics. These probes can be used to stain subcellular structures in fluorescence microscopy, flow citometry and cell sorting, or to stain nucleic acids and proteins in gel electrophoresis. Condensed polyaromatic azonia cations are a family with good fluorescent and DNA intercalating properties. However, the fluorescence intensity of most of these tested cations is efficiently quenched upon complexation with DNA. Herein, we report a small library of azonia cations based on benzimidazolium core. Some of them have shown a significantly fluorescence increase upon DNA addition and promising properties as live-cell fluorescent stains in confocal microscopy of live HeLa cells.

Cita: Matamoros-Recio A, Bosch P, Sucunza D, Mendicuti F, Vaquero JJ, Domingo A (2018) Heteroaromatic azonia cations with application as DNA fluorescent probes. Actas del III Congreso de Señalización Celular, SECUAH 2018. 20-22 de marzo, 2018. Universidad de Alcalá. Alcalá de Henares, Madrid. España. Sesión. dianas 7 (1): e201803. ISSN 1886-8746 (electronic) journal.dianas.e201803. URI http://hdl.handle.net/10017/15181

Copyright: ©2018 Matamoros-Recio A, Bosch P, Sucunza D, Mendicuti F, Vaquero JJ, Domingo A. Some rights reserved. Este es un artículo open-access distribuido bajo los términos de una licencia de Creative Commons Reconocimiento-NoComercial-SinObraDerivada 4.0 Internacional. http://creativecommons.org/licenses/by-nc-nd/4.0/

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dianas 7 (1) Elvira-Blázquez and Díaz-Gago 2018 Screening de inhibidores de NFATc1 para el tratamiento de la osteoporosis.

SECUAH 2018 > Elvira-Blázquez and Díaz-Gago 2018

dianas | Vol 7 No 1 | 2018 | e201803

Screening de inhibidores de NFATc1 para el tratamiento de la osteoporosis.

Departamento de Biología de Sistemas, Facultad de Medicina, UAH

a. daniel.elvira@edu.uah.es  b. sergio.diazgago@edu.uah.es 

III Congreso de Señalización Celular, SECUAH 2018.
20-22 de marzo, 2018. Universidad de Alcalá. Alcalá de Henares, Madrid. España.
Sesión

Resumen

La osteoporosis es una enfermedad caracterizada por el aumento de la fragilidad esquelética debido a una disminución de la masa y calidad ósea, que se debe a un desequilibrio en el balance entre osteoblastos/osteoclastos y que afecta fundamentalmente a cadera, espina vertebral y muñeca. Uno de los motivos de dicho desequilibrio se debe a una mayor diferenciación de monocitos a osteoclastos, proceso regulado por los osteoblastos a través del M-CSF y RANKL. RANKL, se expresa en la membrana de los osteoblastos, y al unirse a su receptor en las células precursoras de osteoblastos, provoca la activación de las vías de señalización de las MAPK de ERK y JNK, de la vía de NF-kB y de la vía de la PLC-calcineurina. Estas vías aumentan la expresión y actividad del factor de transcripción NFATc1, el cual una vez en el núcleo, regula la expresión de proteínas intervienen en la diferenciación y fisiología del osteoclasto. Debido al papel fundamental de NFATc1 en la diferenciación de los osteoclastos, nuestro objetivo es la búsqueda de nuevos inhibidores de NFATc1, en concreto nos centramos en moléculas que inhiban la interacción de NFATc1 con su activador, la calcineurina, que se encarga de defosforilar y por tanto permite su translocación al núcleo. En base a esto y las estructuras de ambas proteínas, diseñamos un HTS que permite encontrar moléculas que inhiban dicha interacción. NFATc1 interacciona con Calcineurina a través de la secuencia consenso de NFATc1, DQYLAVP, y la Calcineuina a través de 4 aminoácidos que interaccionan con dicha secuencia consenso. Las moléculas que diseñamos para inhibir dicha interacción se basan en mimetizar los 4 aminoácidos de la Calcineurina. Para realizar el “screening” de los compuestos miméticos, se realizaron 3 construcciones distintas, una para la subunidad A de la Calcineurina, otra de la subunidad B de la Calcineurina y una tercera para NFATc1. El resultado de estos clonajes serán la Calcineurina con la etiqueta molecular CFP en la subunidad A y NFATc1 con YFP, las cuales empleamos para realizar el primer cribado “in vitro” mediante la técnica del FRET. Aquellos inhibidores que impidieron la interacción entre NFATc1 y Calcineurina, pasaron a un segundo cribado “in vivo” en el que incubamos células osteoclásticas con los inhibidores, y tras su lisado, realizamos un ensayo ELISA para detectar los niveles de p-NFATc1. Finalmente, probamos la toxicidad de los inhibidores empleando células HepG2.

Cita: Elvira-Blázquez D, Díaz-Gago S (2018) Screening de inhibidores de NFATc1 para el tratamiento de la osteoporosis. Actas del III Congreso de Señalización Celular, SECUAH 2018. 20-22 de marzo, 2018. Universidad de Alcalá. Alcalá de Henares, Madrid. España. Sesión. dianas 7 (1): e201803. ISSN 1886-8746 (electronic) journal.dianas.e201803. URI http://hdl.handle.net/10017/15181

Copyright: ©2018 Elvira-Blázquez D, Díaz-Gago S. Some rights reserved. Este es un artículo open-access distribuido bajo los términos de una licencia de Creative Commons Reconocimiento-NoComercial-SinObraDerivada 4.0 Internacional. http://creativecommons.org/licenses/by-nc-nd/4.0/

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dianas 7 (1) Recio-Aldavero etal 2018 Optimización del método de aislamiento de exosomas en orina.

SECUAH 2018 > Recio-Aldavero etal 2018

dianas | Vol 7 No 1 | 2018 | e201803

Optimización del método de aislamiento de exosomas en orina.

jorge.recio@hotmail.com

III Congreso de Señalización Celular, SECUAH 2018.
20-22 de marzo, 2018. Universidad de Alcalá. Alcalá de Henares, Madrid. España.
Sesión

Cita: Recio-Aldavero J, Sanchís-Bonet, Barrionuevo-González M, Bajo-Chueca AM (2018) Optimización del método de aislamiento de exosomas en orina. Actas del III Congreso de Señalización Celular, SECUAH 2018. 20-22 de marzo, 2018. Universidad de Alcalá. Alcalá de Henares, Madrid. España. Sesión. dianas 7 (1): e201803. ISSN 1886-8746 (electronic) journal.dianas.e201803. URI http://hdl.handle.net/10017/15181

Copyright: ©2018 Recio-Aldavero J, Sanchís-Bonet, Barrionuevo-González M, Bajo-Chueca AM. Some rights reserved. Este es un artículo open-access distribuido bajo los términos de una licencia de Creative Commons Reconocimiento-NoComercial-SinObraDerivada 4.0 Internacional. http://creativecommons.org/licenses/by-nc-nd/4.0/

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dianas 7 (1) López-Llorente 2018 Detección y caracterización de interacciones físicas y moleculares en cultivos celulares 3D

SECUAH 2018 > López-Llorente 2018

dianas | Vol 7 No 1 | 2018 | e201803a31

Detección y caracterización de interacciones físicas y moleculares en cultivos celulares 3D

III Congreso de Señalización Celular, SECUAH 2018.
20-22 de marzo, 2018. Universidad de Alcalá. Alcalá de Henares, Madrid. España.
Sesión A3 – Biología y Tecnología Celular

Cita: López-Llorente V (2018) Detección y caracterización de interacciones físicas y moleculares en cultivos celulares 3D. Actas del III Congreso de Señalización Celular, SECUAH 2018. 20-22 de marzo, 2018. Universidad de Alcalá. Alcalá de Henares, Madrid. España. Sesión A3 – Biología y Tecnología Celular. dianas 7 (1): e201803a31. ISSN 1886-8746 (electronic) journal.dianas.e201803a31. URI http://hdl.handle.net/10017/15181

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dianas 7 (1) Bort etal 2018 Nuevo activador de AMPK como agente antitumoral en cáncer de próstata

SECUAH 2018 > Bort etal 2018

dianas | Vol 7 No 1 | marzo 2018 | e201803a11

Nuevo activador de AMPK como agente antitumoral en cáncer de próstata

Universidad de Alcalá

aliciabort@gmail.com

III Congreso de Señalización Celular, SECUAH 2018.
20-22 de marzo, 2018. Universidad de Alcalá. Alcalá de Henares, Madrid. España.
Sesión A1 - Cáncer

Resumen

La quinasa activada por adenosín monofosfato (AMPK) es una serín-treonín quinasa formada por tres subunidades: una catalítica (α) y dos reguladoras (β y γ), que actúa como sensor de la energía celular inhibiendo procesos anabólicos y activando procesos catabólicos. Recientemente se ha observado que además ejerce otras funciones como el bloqueo del ciclo celular o la regulación de la autofagia. Por ello se ha convertido en un objetivo terapéutico para el tratamiento del cáncer. AMPK tiene especial importancia en cáncer de próstata, ya que la activación de la vía lipogénica se correlaciona con la progresión y la agresividad del tumor. El objetivo de este trabajo ha sido valorar el efecto de una nueva serie de derivados de 2-oxindol con sobre la actividad de AMPK, así como su perfil antitumoral en células de cáncer de próstata. Uno de los compuestos estudiados 8c, activó significativamente AMPK en células de cáncer de próstata PC-3, DU145 y LNCaP, inhibiendo a la vez su viabilidad célular. El compuesto 8c redujo notablemente el crecimiento de tumores de células PC3 trasplantados en ratones. En conclusión, nuestros resultados muestran que un nuevo derivado fluorado del 2-oxindol presenta un efecto antitumoral in vivo en células de cáncer de próstata a través de la activación de AMPK, dándonos una estrategia terapéutica prometedora para el tratamiento del cáncer de próstata andrógeno-independiente.

Cita: Bort A, Sánchez-Gómez B, Mateos-Gómez P, Castro A, Rodríguez-Henche N, Díaz-Laviada I (2018) Nuevo activador de AMPK como agente antitumoral en cáncer de próstata. Actas del III Congreso de Señalización Celular, SECUAH 2018. 20-22 de marzo, 2018. Universidad de Alcalá. Alcalá de Henares, Madrid. España. Sesión A1 - Cáncer. dianas 7 (1): e201803a11. ISSN 1886-8746 (electronic) journal.dianas.e201803a11. URI http://hdl.handle.net/10017/15181

Copyright: ©2018 Bort A, Sánchez-Gómez B, Mateos-Gómez P, Castro A, Rodríguez-Henche N, Díaz-Laviada I. Some rights reserved. Este es un artículo open-access distribuido bajo los términos de una licencia de Creative Commons Reconocimiento-NoComercial-SinObraDerivada 4.0 Internacional. http://creativecommons.org/licenses/by-nc-nd/4.0/

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dianas 7 (1) Herraiz-López etal 2018 Exosomas en sangre como biomarcadores diagnóstico y pronóstico en el cáncer de próstata

SECUAH 2018 > Herraiz-López etal 2018

dianas | Vol 7 No 1 | 2018 | e201803p01

Exosomas en sangre como biomarcadores diagnóstico y pronóstico en el cáncer de próstata

1. Hospital Universitario Príncipe de Asturias. Carretera Alcalá-Meco S/N, Alcalá de Henares, Madrid. España.  2. Departamento de Biología de Sistemas, Universidad de Alcalá. Alcalá de Henares, Madrid. España. 

a. maria.herraiz.lopez@gmail.com  b. ana.bajo@uah.es 

III Congreso de Señalización Celular, SECUAH 2018.
20-22 de marzo, 2018. Universidad de Alcalá. Alcalá de Henares, Madrid. España.
Sesión

Resumen

El cáncer de próstata (CP) es la neoplasia primaria más frecuente en nuestro entorno, con una mortalidad del 18%. Como biomarcadores séricos para su diagnóstico y pronóstico, se utilizan el antígeno prostático específico (PSA) y sus derivados (densidad de PSA, fracción libre de PSA y [-2]proPSA), además de la calicreína humana 2. Desde el punto de vista diagnóstico, el PSA es muy sensible pero poco específico y además en la enfermedad hormonorefractaria no resulta útil para su seguimiento. Recientemente, marcadores genómicos (como el PCA3) han mostrado su utilidad discriminando a varones con alto riesgo de desarrollar CP y cánceres agresivos, por lo que podrían ser una fuente de dianas terapéuticas en un futuro. En este contexto, los estudios sobre exosomas están arrojando resultados muy prometedores, aunque no existe una validación de los mismos desde el punto de vista diagnóstico y pronóstico. Esta revisión pretende demostrar la utilidad de los exosomas en sangre en el diagnóstico y pronóstico del CP. Los exosomas son nanovesículas liberadas por todos los tipos celulares que intervienen en la comunicación intercelular, pero también están implicados en el desarrollo y progresión del cáncer. Contienen proteínas, ácidos nucleicos, lípidos y metabolitos, que portan información y material genético de las células que los secretan. Se caracterizan por la presencia de proteínas específicas: tetraspaninas, proteínas transportadoras (ESCRT), anexinas, proteínas de choque térmico, integrinas y GTPasas de la familia RAB. Los exosomas secretados por la próstata (prostatosomas) pueden aislarse en semen, tejido, sangre y orina. Existen varios métodos de extracción y purificación: centrifugación secuencial y ultracentrifugación, filtración, aislamiento basado en inmunoafinidad y técnicas de microfluídos. Los prostatosomas se obtienen del plasma de pacientes con CP (centrifugación de la sangre extraída por venopunción), mediante ultracentrifugación o utilizando conjugados con anticuerpos anti-CD9 y anti-antígeno de membrana próstata específico (PSMA). Como los prostatosomas son únicos en tamaño, composición lipídica y contenido proteico, pueden identificarse por Western blotting, cuantificación proteica o microscopía electrónica de transmisión; así como detectando marcadores prostáticos (PSMA y receptor androgénico). El reto es encontrar biomarcadores específicos en la superficie de prostatosomas de células cancerosas que permitan aislarlos del resto de exosomas en líquidos biológicos, aumentando su utilidad clínica. Los exosomas están implicados en el crecimiento y progresión tumoral, angiogénesis, preparación de nichos pre-metastásicos y resistencia al tratamiento. La concentración de exosomas séricos es mayor en pacientes con cáncer. En hipoxia (relacionada con mal pronóstico, fracaso de tratamiento y recaídas), se secretan más prostatosomas y contienen más triglicéridos y proteínas que promueven la transición epitelio-mesenquimal, invasividad e indiferenciación celular, y aumentan la expresión de actina en fibroblastos de próstata normales, dando lugar a un fenotipo de fibroblasto asociado a cáncer. Los exosomas séricos revelan información de las células que los secretan, usándose como “biopsia líquida” para identificar nuevos marcadores en el diagnóstico temprano, pronóstico y búsqueda de nuevas terapias frente al cáncer. Por tanto, los análisis de exosomas ofrecen una oportunidad única para desarrollar nuevos biomarcadores de proteínas y/o ácidos nucleicos para detectar y monitorizar CP, especialmente en el CP metastásico y hormono-refractario.

Cita: Herraiz-López M, Bajo-Chueca AM, Sanchís-Bonet (2018) Exosomas en sangre como biomarcadores diagnóstico y pronóstico en el cáncer de próstata. Actas del III Congreso de Señalización Celular, SECUAH 2018. 20-22 de marzo, 2018. Universidad de Alcalá. Alcalá de Henares, Madrid. España. Sesión. dianas 7 (1): e201803p01. ISSN 1886-8746 (electronic) journal.dianas.e201803p01. URI http://hdl.handle.net/10017/15181

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dianas 7 (1) Antón-Cornejo etal 2018 Exosomas en orina como biomarcadores diagnóstico y pronóstico en el cáncer de próstata

SECUAH 2018 > Antón-Cornejo etal 2018

dianas | Vol 7 No 1 | 2018 | e201803p02

Exosomas en orina como biomarcadores diagnóstico y pronóstico en el cáncer de próstata

1. Hospital Universitario Príncipe de Asturias. Carretera Alcalá-Meco S/N, Alcalá de Henares.  2. Departamento de Biología de Sistemas. Univerisdad de Alcalá. 

a. albaantcor@gmail.com  b. ana.bajo@uah.es 

III Congreso de Señalización Celular, SECUAH 2018.
20-22 de marzo, 2018. Universidad de Alcalá. Alcalá de Henares, Madrid. España.
Sesión

Resumen

El cáncer de próstata (CaP) es un problema global de salud. Atendiendo a la base de datos de GLOBOCAN el CaP es el segundo tipo de cáncer más frecuente en varones (15%). El descubrimiento del antígeno prostático específico (PSA) supuso un cambio en la forma de diagnosticar y tratar la enfermedad, siendo la herramienta más usada en el cribado y monitorización de la enfermedad. Sin embargo, los beneficios en términos de supervivencia cáncer-específica asociados al cribado con PSA son contradictorios. Los avances alcanzados con las nuevas terapias ponen de manifiesto más aún la necesidad de encontrar biomarcadores que puedan predecir mejor la respuesta a las nuevas terapias y, por tanto, una mejor selección de los pacientes para dichas terapias. La identificación de biomarcadores contenidos en plasma y orina (biopsia líquida) representaría una técnica no invasiva de diagnóstico y pronóstico, siendo de particular importancia puesto que pueden obtenerse en cualquier momento a lo largo del curso de la enfermedad y podrían reflejar mejor la heterogeneidad en el comportamiento del tumor frente a los hallazgos de una biopsia aislada de próstata. Los rápidos avances en las técnicas genómicas y proteómicas han hecho posible identificar un gran número de biomoléculas que portan unos de los marcadores más prometedores, los exosomas. Éstos son pequeñas vesículas de membrana de 30-100 nm contienen proteínas (CD63, LAMP-2, CD9), ADN, genes de fusión, ARNm, microARN (miARN), otros RNA no codificantes y diversos lípidos. En este sentido, el antígeno de membrana específico de próstata (PSMA) es una glicoproteína de membrana celular liberada desde los exosomas, y es por tanto un marcador de la expresión de los mismos en distintos tejidos y en distintos fluidos, como plasma y orina. Una gran variedad de tipos celulares liberan exosomas; entre ellos, eritrocitos, linfocitos, plaquetas, células dendríticas y tumorales. Cuando los exosomas liberan su contenido al espacio extracelular participan como transmisores de señales de comunicación entre células, transfiriendo componentes biológicamente activos. Además, se ha descrito que las células de cáncer de próstata producen un mayor número de exosomas con un contenido diferencial, siendo aún más relevante esta sobreexpresión en células hormono-refractarias y metastásicas. Como la expresión de los exosomas puede modificarse tras tratamiento hormonal, una de las ventajas que pueden ofrecer estos biomarcadores exosomales frente al PSA es su independencia del receptor androgénico, por lo que su expresión no se ve afectada y puede aislarse antes, durante y después del tratamiento. La permeabilidad linfática y sanguínea de los exosomas procedentes de células tumorales, la estimulación de la angiogénesis, el favorecimiento de la migración, el crecimiento de nichos metastásicos, la proliferación celular tumoral y la generación de resistencias a fármacos, son propiedades responsables de la progresión del cáncer. Un biomarcador ideal es áquel que posea una elevada especificidad y sensibilidad en el diagnóstico y pronóstico de enfermedad, con la menor invasividad. El objetivo de este trabajo es presentar una revisión actualizada del papel que tienen los exosomas que se pueden aislar en la orina (prostatosomas) de los varones con CaP. Para ello expondremos la literatura más actualizada en las técnicas que permiten aislarlos (ultracentrifugación secuencial, la ultrafiltación y el uso de anticuerpos conjugados anti-CD9), identificarlos (ensayos de cuantificación proteica, Western blot y microscopía electrónica de transmisión, así como también la determinación de PSMA.

Cita: Antón-Cornejo A, Bajo-Chueca AM, Sanchís-Bonet (2018) Exosomas en orina como biomarcadores diagnóstico y pronóstico en el cáncer de próstata. Actas del III Congreso de Señalización Celular, SECUAH 2018. 20-22 de marzo, 2018. Universidad de Alcalá. Alcalá de Henares, Madrid. España. Sesión. dianas 7 (1): e201803p02. ISSN 1886-8746 (electronic) journal.dianas.e201803p02. URI http://hdl.handle.net/10017/15181

Copyright: ©2018 Antón-Cornejo A, Bajo-Chueca AM, Sanchís-Bonet. Some rights reserved. Este es un artículo open-access distribuido bajo los términos de una licencia de Creative Commons Reconocimiento-NoComercial-SinObraDerivada 4.0 Internacional. http://creativecommons.org/licenses/by-nc-nd/4.0/

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dianas 7 (1) Gallego-Tamayo etal 2018 La vía glucolítica es necesaria para la supervivencia de las células tumorales tiroideas con el oncogen V600E-BRAF

SECUAH 2018 > Gallego-Tamayo etal 2018

dianas | Vol 7 No 1 | 2018 | e201803a22

La vía glucolítica es necesaria para la supervivencia de las células tumorales tiroideas con el oncogén V600EBRAF

Departamento Biología de Sistemas, Facultad de Medicina. Universidad de Alcalá de Henares, Madrid. España.

bgallego28@gmail.com

III Congreso de Señalización Celular, SECUAH 2018.
20-22 de marzo, 2018. Universidad de Alcalá. Alcalá de Henares, Madrid. España.
Sesión

Resumen

El cáncer de tiroides es el tumor endocrino más común y, aunque es altamente curativo, presenta una elevada tasa de recurrencia [1]. Una de las mutaciones más frecuentes en este tipo de tumores es la sustitución de la Valina 600 por un Glutámico (V600E) en la proteína BRAF. Esta mutación causa una hiperactivación de la vía de las ERK-MAPKs, favoreciendo la proliferación e invasividad tumoral e inhibiendo la muerte celular por apoptosis [2,3]. Sin embargo, las terapias con inhibidores de BRAF no dan los resultados esperados en el tratamiento del cáncer de tiroides, ya que, por una parte estas células crean resistencia a este tratamiento y, por otra, causan importantes efectos adversos en la piel asociadas a hiperproliferación llegando, en algunos casos, a producirse carcinomas de células escamosas y queratoacantomas en un 15-30% de los pacientes [4]. Debido a esto, se plantea la necesidad de utilizar terapias combinadas para aumentar la efectividad y especificidad del tratamiento en este tipo de cáncer. Por otra parte, las células tumorales reprograman su metabolismo energético por modificaciones en la expresión y actividad de enzimas metabólicas, para favorecer la proliferación acelerada. Por ello, el metabolismo de las células tumorales es una diana emergente para el tratamiento del cáncer, pudiendo usarse como terapia combinada con otros compuestos para aumentar la eficacia del tratamiento [5-8]. Por todo esto, estudiamos el papel que posee el metabolismo glucídico en células tumorales tiroideas que presentan la mutación V600EBRAF sobre la viabilidad celular y la sensibilidad al tratamiento con PLX4720, un inhibidor de V600EBRAF. Nosotros demostramos, en primer lugar, que la falta de glucosa o la inhibición de su metabolismo, con el compuesto 2-Deoxyglucosa, disminuye la supervivencia, determinada mediante ensayo de MTT, en la línea celular BHT101, derivada de un tumor anaplásico tiroideo. A continuación, estudiamos la relación del oncogén V600EBRAF con la captura de glucosa, medida con una sonda fluorescente y citometria de flujo, y la expresión de proteínas reguladoras de la via glucolítica GLUT1, HK2, LDHA y PKM2, por inmunodetección y RT-qPCR. La eliminación de la actividad y expresión de BRAF, mediante el tratamiento de las células con el inhibidor PLX4720 o tras su silenciamiento con siRNA. disminuyen la captura de glucosa por parte de las células BHT101, así como los niveles todas las proteínas estudiadas. Por último, para comprobar si la inhibición del metabolismo glucídico aumenta la sensibilidad a PLX4720, determinamos el efecto sobre la viabilidad celular del tratamiento conjunto con el inhibidor de la glucolisis 2-Deoxyglucosa y el PLX4720. Nuestros resultados muestran que el tratamiento con PLX4720 junto con la inhibición de la glucolisis produce mayores efectos sobre la disminución de la viabilidad celular que cada tratamiento por separado, observándose un efecto sinérgico. Todos estos datos indican que V600EBRAF modula el metabolismo glucídico y que la glucolisis es necesaria para la supervivencia de las células tumorales tiroideas, por lo que podría ser utilizada como una diana terapéutica en los tumores tiroideos con la mutación V600EBRAF que no responden adecuadamente al tratamiento convencional con PLX4720.




  1. Migzhao, Xing. 2013. Molecular pathogenesis and mechanisms of thyroid cancer. Nature Reviews/Cancer, 13:184-99.

  2. Kam-Tsun, Tang y Chen Hsen, Lee. 2010. BRAF mutation in papillary thyroid carcinoma: pathogenic role and clinical implicaions. J Chin Med Assoc., 73 (3):113-128.

  3. Karasarides M, Chiloeches A, Hayward R, Niculescu‐Duvaz D, Scanlon I, Friedlos F, y cols. 2004. B‐RAF is a therapeutic target in melanoma. Oncogene, 23(37): 6292‐

  4. Flaherty, K., Puzanov, I., Sosman, J., Kim, K., Ribas, A., McArthur, G., et al. 2009. Phase I study of PLX4032: Proof of concept for V600EBRAF mutation as a therapeutic target. J Clin Oncol., 27.

  5. Vander Heiden MG, et al. 2010. Evidence for an alternative glycolytic pathway in rapidly proliferating cells. 329: 1492–99.

  6. D. Amoedo, E. Obre, R.Rossignol. 2017. Drug Discovery strategies in the field of tumor energy metabolism: limitations by metabolic flexibility and metabolic ressistance to chemotherapy. Biochim. Byophys. Acta.

  7. Nissim Hay. 2016. Reprogramming glucose metabolism in cancer: can it be exploited for cancer therapy. Nature reviews. 16:635-649.

  8. WangS-Y,WeiY-H,ShiehD-B,LinL-L, ChengS-P,WangP-W,et al. 2015. 2-Deoxy-DGlucose Can Complement Doxorubicin and Sorafenib to Suppress the Growth of Papillary Thyroid Carcinoma Cells. PLoSONE10(7): e0130959.doi:10.1371/journal.pone.0130959.

Cita: Gallego-Tamayo B, Jiménez-Mora EM, Chiloeches A (2018) La vía glucolítica es necesaria para la supervivencia de las células tumorales tiroideas con el oncogén V600EBRAF. Actas del III Congreso de Señalización Celular, SECUAH 2018. 20-22 de marzo, 2018. Universidad de Alcalá. Alcalá de Henares, Madrid. España. Sesión. dianas 7 (1): e201803a22. ISSN 1886-8746 (electronic) journal.dianas.e201803a22. URI http://hdl.handle.net/10017/15181

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dianas 7 (1) Agudiez etal 2018 Pardeamiento de la grasa para combatir la obesidad

SECUAH 2018 > Agudiez etal 2018

dianas | Vol 7 No 1 | marzo 2018 | e201803

Pardeamiento de la grasa para combatir la obesidad

Universidad de Alcalá. Master Universitario en Dianas Terapéuticas en Señalización Celular, Investigación y Desarrollo

a. magudiezperez18@gmail.com  b. sofiacam@ucm.es  c. m.galvezs@hotmail.com  d. carlotatbitri@gmail.com  e. ainacmesquida@gmail.com 

III Congreso de Señalización Celular, SECUAH 2018.
20-22 de marzo, 2018. Universidad de Alcalá. Alcalá de Henares, Madrid. España.
Sesión

Resumen

La obesidad, definida como una acumulación excesiva de grasa corporal, se ha llegado a definir como la pandemia del siglo XXI. Tradicionalmente se ha atribuido al desequilibrio entre la ingesta y el gasto de energía o a la ausencia de actividad física pero hoy en día se sabe que existe una relación con otras enfermedades y que el factor genético es responsable, de al menos, un 33% de los casos. La fisiopatología de la obesidad cursa con una inflamación crónica y la implicación de distintas vías de señalización entre las que destaca la vía Notch. Además, se distinguen dos tipos de grasa (grasa blanca y grasa parda) tanto por su histología como por la expresión de distintos marcadores (UCP-1 específico de la grasa parda). Mientras que la grasa blanca actúa como reservorio de energía, la grasa parda tiene una función de termogénesis. Es por ello que se ha elegido el pardeamiento de la grasa (o transformación de grasa blanca en grasa parda mediado por la vía Notch) como proceso para la búsqueda de un posible tratamiento contra la obesidad. Con este objetivo se propone la realización de un ensayo de High Throughput Screening o HTS libre de células basado en la tecnología AlpaLISA para el cribado de una biblioteca de más de 2 millones de compuestos que nos permita identificar posibles compuestos candidatos capaces de inhibir la actividad de la y-secretasa (diana farmacológica elegida). Con el objetivo de aumentar la eficacia y disminuir la toxicidad de los compuestos candidatos generados, se desarrollaron distintos estudios tanto in vitro como in vivo y se propuso un mecanismo de vehiculización basado en nanopartículas compuestas por PLGA (poly lactide-co glycolide) con un marcador específico de tejido adiposo para la óptima acción del fármaco.

Cita: Agudiez M, Campillo S, Galvez M, Tosat C, Mesquida AC (2018) Pardeamiento de la grasa para combatir la obesidad. Actas del III Congreso de Señalización Celular, SECUAH 2018. 20-22 de marzo, 2018. Universidad de Alcalá. Alcalá de Henares, Madrid. España. Sesión. dianas 7 (1): e201803. ISSN 1886-8746 (electronic) journal.dianas.e201803. URI http://hdl.handle.net/10017/15181

Copyright: ©2018 Agudiez M, Campillo S, Galvez M, Tosat C, Mesquida AC. Some rights reserved. Este es un artículo open-access distribuido bajo los términos de una licencia de Creative Commons Reconocimiento-NoComercial-SinObraDerivada 4.0 Internacional. http://creativecommons.org/licenses/by-nc-nd/4.0/

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