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dianas 7 (1) Menor-Salván 2018 El charco caliente de Darwin, el hacha de mi abuelo y la evolución química de los ácidos nucleicos

SECUAH 2018 > Menor-Salván 2018

dianas | Vol 7 No 1 | marzo 2018 | e201803

El charco caliente de Darwin, el hacha de mi abuelo y la evolución química de los ácidos nucleicos

III Congreso de Señalización Celular, SECUAH 2018.
20-22 de marzo, 2018. Universidad de Alcalá. Alcalá de Henares, Madrid. España.
Conferencia de Clausura

Cita: Menor-Salván C (2018) El charco caliente de Darwin, el hacha de mi abuelo y la evolución química de los ácidos nucleicos. Actas del III Congreso de Señalización Celular, SECUAH 2018. 20-22 de marzo, 2018. Universidad de Alcalá. Alcalá de Henares, Madrid. España. Conferencia de Clausura. dianas 7 (1): e201803. ISSN 1886-8746 (electronic) journal.dianas.e201803. URI http://hdl.handle.net/10017/15181

Copyright: ©2018 Menor-Salván C. Some rights reserved. Este es un artículo open-access distribuido bajo los términos de una licencia de Creative Commons Reconocimiento-NoComercial-SinObraDerivada 4.0 Internacional. http://creativecommons.org/licenses/by-nc-nd/4.0/

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dianas 7 (1) Lavín-López 2018 Grafeno: un material con futuro en biomedicina

SECUAH 2018 > Lavín-López 2018

dianas | Vol 7 No 1 | marzo 2018 | e201803

Grafeno: un material con futuro en biomedicina

pradolavin@graphenano.com

III Congreso de Señalización Celular, SECUAH 2018.
20-22 de marzo, 2018. Universidad de Alcalá. Alcalá de Henares, Madrid. España.
Conferencia Inaugural

Cita: Lavín-López MDP (2018) Grafeno: un material con futuro en biomedicina. Actas del III Congreso de Señalización Celular, SECUAH 2018. 20-22 de marzo, 2018. Universidad de Alcalá. Alcalá de Henares, Madrid. España. Conferencia Inaugural. dianas 7 (1): e201803. ISSN 1886-8746 (electronic) journal.dianas.e201803. URI http://hdl.handle.net/10017/15181

Copyright: ©2018 Lavín-López MDP. Some rights reserved. Este es un artículo open-access distribuido bajo los términos de una licencia de Creative Commons Reconocimiento-NoComercial-SinObraDerivada 4.0 Internacional. http://creativecommons.org/licenses/by-nc-nd/4.0/

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dianas 7 (1) Madrigal-Martínez etal 2018 Prostaglandina E-2 intracelular activa los fenotipos tumorales en cáncer de próstata a través de la ciclooxigenasa-2

SECUAH 2018 > Madrigal-Martínez etal 2018

dianas | Vol 7 No 1 | 2018 | e201803

Prostaglandina E-2 intracelular activa los fenotipos tumorales en cáncer de próstata a través de la ciclooxigenasa-2

antoniomadrigalmartinez@gmail.com

III Congreso de Señalización Celular, SECUAH 2018.
20-22 de marzo, 2018. Universidad de Alcalá. Alcalá de Henares, Madrid. España.
Sesión

Resumen

Ciclooxigenasa-2 (COX-2) es uno de los mediadores de la inflamación que juega un papel importante en la progresión del cáncer de próstata (CP), produce diferentes prostanoides, como la prostaglandina E2. Además, el factor inducible por hipoxia 1α (HIF-1α) juega un papel muy importante en CP, al inducir numerosos genes que contribuyen a la progresión del CP. Estudios previos de nuestro grupo de investigación, han demostrado que PGE2 intracelular (iPGE2) es capaz de activar diferentes fenotipos tumorales en células de CP y que existe una retroalimentación positiva COX-2-PGE2 que amplifica la señal inflamatoria iniciada por COX-2, ya que iPGE2 aumenta la expresión de COX-2 en células de CP. Nuestro objetivo es estudiar si iPGE2 activa los fenotipos de manera dependiente de COX-2 en una línea celular representativa de un estadio andrógeno-independiente de cáncer de próstata (PC3). Nuestros resultados muestran que iPGE2 disminuye la adhesión celular y aumenta la proliferación, migración e invasión celular, y aumenta la expresión de HIF-1α de forma dependiente de COX-2. Estos resultados sugieren que el aumento de expresión de COX-2 es fundamental para que iPGE2 active los diferentes fenotipos tumorales, contribuyendo a la progresión de CP.

Cita: Madrigal-Martínez A, Fernández-Martínez AB, de-Lucio-Cazaña FJ (2018) Prostaglandina E-2 intracelular activa los fenotipos tumorales en cáncer de próstata a través de la ciclooxigenasa-2. Actas del III Congreso de Señalización Celular, SECUAH 2018. 20-22 de marzo, 2018. Universidad de Alcalá. Alcalá de Henares, Madrid. España. Sesión. dianas 7 (1): e201803. ISSN 1886-8746 (electronic) journal.dianas.e201803. URI http://hdl.handle.net/10017/15181

Copyright: ©2018 Madrigal-Martínez A, Fernández-Martínez AB, de-Lucio-Cazaña FJ. Some rights reserved. Este es un artículo open-access distribuido bajo los términos de una licencia de Creative Commons Reconocimiento-NoComercial-SinObraDerivada 4.0 Internacional. http://creativecommons.org/licenses/by-nc-nd/4.0/

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dianas 7 (1) Lucas-Romero and López-García 2018 Actividad espontánea en el asta dorsal de la médula espinal y sus mecanismos subyacentes

SECUAH 2018 > Lucas-Romero and López-García 2018

dianas | Vol 7 No 1 | 2018 | e201803b31

Actividad espontánea en el asta dorsal de la médula espinal y sus mecanismos subyacentes

Departamento de Biología de Sistemas UAH, Edificio de Medicina, Universidad de Alcalá, Campus Universitario, 28871 Alcalá de Henares, Madrid, España.

javierdelucas7@hotmail.com

III Congreso de Señalización Celular, SECUAH 2018.
20-22 de marzo, 2018. Universidad de Alcalá. Alcalá de Henares, Madrid. España.
Sesión

Resumen

Las láminas superficiales de la médula espinal constituyen el primer punto de relevo y procesamiento de la información nociceptiva. La mayoría de las neuronas que aquí se encuentran son interneuronas de circuito local, algunas de las cuales disparan de manera espontánea con unos patrones característicos. Es probable que cada patrón esté mediado por corrientes iónicas específicas. Estos patrones pueden constituir un elemento clave en el código neural, que puede cambiar en situación de dolor crónico. Utilizando una rodaja longitudinal de médula espinal in vitro se han registrado mediante matrices de microelectrodos (MEAs) neuronas en láminas superficiales que presentaban actividad espontánea. Asimismo, se evaluó el posible automatismo de los patrones de disparo y la participación de la corriente Ih y la corriente persistente de sodio en el mantenimiento de alguno de estos ritmos. Las neuronas se clasificaron en función de su patrón de actividad espontánea (dependiendo de su regularidad, presencia o no de ráfagas y frecuencia de disparo). Se observó que las neuronas con un patrón regular son particularmente resistentes al bloqueo sináptico. Esto parece indicar que dichos patrones de disparo tienen un importante componente intrínseco. Además, el bloqueo específico de la corriente Ih y de la corriente persistente de sodio produjo una inhibición completa de la actividad espontanea en muchas de estas neuronas, indicando un papel relevante de estas conductancias en el mantenimiento de los ritmos intrínsecos.

Cita: Lucas-Romero J, López-García JA (2018) Actividad espontánea en el asta dorsal de la médula espinal y sus mecanismos subyacentes. Actas del III Congreso de Señalización Celular, SECUAH 2018. 20-22 de marzo, 2018. Universidad de Alcalá. Alcalá de Henares, Madrid. España. Sesión. dianas 7 (1): e201803b31. ISSN 1886-8746 (electronic) journal.dianas.e201803b31. URI http://hdl.handle.net/10017/15181

Copyright: ©2018 Lucas-Romero J, López-García JA. Some rights reserved. Este es un artículo open-access distribuido bajo los términos de una licencia de Creative Commons Reconocimiento-NoComercial-SinObraDerivada 4.0 Internacional. http://creativecommons.org/licenses/by-nc-nd/4.0/

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dianas 7 (1) Sánchez-Martín etal 2018 Bases moleculares de la actividad anti-tumoral de nuevos agentes terapéuticos derivados de la hispanolona

SECUAH 2018 > Sánchez-Martín etal 2018

dianas | Vol 7 No 1 | 2018 | e201803

Bases moleculares de la actividad anti-tumoral de nuevos agentes terapéuticos derivados de la hispanolona

Instituto de Salud Carlos III / Universidad Complutense de Madrid

vanesa_sanchez_92@hotmail.com

III Congreso de Señalización Celular, SECUAH 2018.
20-22 de marzo, 2018. Universidad de Alcalá. Alcalá de Henares, Madrid. España.
Sesión de paneles

Resumen

Los productos naturales desempeñan un papel fundamental en el descubrimiento de nuevos fármacos, particularmente evidente en áreas como el cáncer, donde alrededor del 60% de los agentes terapéuticos utilizados son de origen natural. Los terpenos son un grupo químico de amplia distribución en la naturaleza a los que se les han atribuido actividades biológicas diversas: antiinflamatoria, antiviral, antiproliferativa y antibacteriana, entre otras. En este proyecto queremos evaluar el potencial anti-tumoral de un diterpeno de tipo labdano derivado de la hispanolona, el α-hispanolol, en células de glioblastoma, uno de los tumores cerebrales más agresivos a día de hoy y para el que todavía no existen terapias eficaces. Nuestros resultados muestran que el α-hispanolol produce cambios morfológicos y disminuye la viabilidad celular de las líneas celulares U87 y U373 de manera dosis- y tiempo-dependiente. Además, el compuesto induce apoptosis y arresta el ciclo celular en la fase G0/G1, acumulándose las células en la fase sub-G0. El α-hispanolol aumenta la actividad de las caspasas y la expresión de proteínas pro-apoptóticas (Bax y Bid) e inhibe la expresión de proteínas anti-apoptóticas (Bcl-2 y Bcl-xl). Además, el compuesto presenta un efecto inhibitorio de la migración y de la invasión, disminuyendo la actividad de las MMPs. Como conclusión, nuestros datos sugieren que el α-hispanolol podría tener potencial terapéutico en el tratamiento de los glioblastomas.

Cita: Sánchez-Martín V, Hortelano-Blanco S, de-las-Heras-Polo B (2018) Bases moleculares de la actividad anti-tumoral de nuevos agentes terapéuticos derivados de la hispanolona. Actas del III Congreso de Señalización Celular, SECUAH 2018. 20-22 de marzo, 2018. Universidad de Alcalá. Alcalá de Henares, Madrid. España. Sesión de paneles. dianas 7 (1): e201803. ISSN 1886-8746 (electronic) journal.dianas.e201803. URI http://hdl.handle.net/10017/15181

Copyright: ©2018 Sánchez-Martín V, Hortelano-Blanco S, de-las-Heras-Polo B. Some rights reserved. Este es un artículo open-access distribuido bajo los términos de una licencia de Creative Commons Reconocimiento-NoComercial-SinObraDerivada 4.0 Internacional. http://creativecommons.org/licenses/by-nc-nd/4.0/

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dianas 7 (1) Yllera-García etal 2018 Exosomes as new tools for searching relevant proteins in colorectal cancer metastasis

SECUAH 2018 > Yllera-García etal 2018

dianas | Vol 7 No 1 | 2018 | e201803

Exosomes as new tools for searching relevant proteins in colorectal cancer metastasis

Centro de Investigaciones Biológicas, CSIC

beatriz.yllera@gmail.com

III Congreso de Señalización Celular, SECUAH 2018.
20-22 de marzo, 2018. Universidad de Alcalá. Alcalá de Henares, Madrid. España.
Sesión

Resumen

Exosomes are extracellular vesicles with a wide range of functions, including metastasis seeding, in most types of cancer. The aim of this study was to find proteins critical for colorectal cancer metastasis. A non-metastatic murine model of colorectal cancer was compared with the metastatic mouse cell line CT-26 to investigate the exosomal protein content. To optimize the recovery of exosomes, cells were incubated in serum-free DMEM for 48h. Colon tissues were incubated for 2, 4 and 8h in serum-free DMEM. The exosomes were isolated by ultracentrifugation and lysated with different buffers: 7M urea/2M thiourea, methanol-chloroform and RIPA buffer. Exosomal lysates were analyzed in the Q-Exactive using a gradient: 5–35% (90min), 35%-100% (4min) and 100% (8min) ACN with 0.1% formic acid. Mass spectra were acquired using a “top 15” method and searched against SwissProt using Sequest HT search engine through Proteome Discoverer. Identified peptides were filtered using Percolator with a q-value threshold of 0.01 at a FDR of 1%. The largest amount of mouse exosomes from colon was recovered at 2h. The 7M urea / 2M thiourea buffer was the most effective lysis method, with 35% more exosomal proteins detected by mass spectrometry. The identified proteins correlated with: remodelling of the ECM, organotropism, angiogenesis and chemo-attraction, EMT, cellular metabolism, etc. Significant differences were observed between metastatic and non-metastatic exosomes. Proteins of metastatic exosomes are largely related to the interaction and modulation of the extracellular matrix and cell migration, including α3 and α5 integrins, in contrast to the non-metastatic exosomes. Laminins α5, β1 and ɣ1, which form laminin-511, are major candidates for further studies. Methods for extracting and lysing exosomes from mouse colon and metastatic cells were optimised. A preliminary protein profile involved in metastasis has been obtained and will be further analysed using functional experiments. Keywords: exosomes, metastasis, colorectal cancer, extracellular matrix, mouse models.

Cita: Yllera-García B, de-los-Rios-Benítez V, Casal-Álvarez JI (2018) Exosomes as new tools for searching relevant proteins in colorectal cancer metastasis. Actas del III Congreso de Señalización Celular, SECUAH 2018. 20-22 de marzo, 2018. Universidad de Alcalá. Alcalá de Henares, Madrid. España. Sesión. dianas 7 (1): e201803. ISSN 1886-8746 (electronic) journal.dianas.e201803. URI http://hdl.handle.net/10017/15181

Copyright: ©2018 Yllera-García B, de-los-Rios-Benítez V, Casal-Álvarez JI. Some rights reserved. Este es un artículo open-access distribuido bajo los términos de una licencia de Creative Commons Reconocimiento-NoComercial-SinObraDerivada 4.0 Internacional. http://creativecommons.org/licenses/by-nc-nd/4.0/

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dianas 7 (1) González-Cofrade etal 2018 Molecular basis for the pharmacological activity of terpenes

SECUAH 2018 > González-Cofrade etal 2018

dianas | Vol 7 No 1 | 2018 | e201803

Molecular basis for the pharmacological activity of terpenes

Universidad Complutense de Madrid

lagonz11@ucm.es; lauragoncof@gmail.com

III Congreso de Señalización Celular, SECUAH 2018.
20-22 de marzo, 2018. Universidad de Alcalá. Alcalá de Henares, Madrid. España.
Sesión de paneles

Resumen

Natural products have represented an excellent source for drug discovery and development. Among them, diterpenes display many pharmacological properties with therapeutic potential. A series of labdane diterpenes derivatives from solidagenone (isolated from the rhizomes of Solidago chilensis) have been tested for antiinflammatory activity in targets related to the inflammatory process. Uncontrolled inflammation could lead to serious disorders due to the overproduction of inflammatory mediators, in consequence of uncontrolled inflammasome activation and the up-regulation of pro-inflammatory enzymes, playing critical roles in numerous pathological conditions.

Cita: González-Cofrade L, Cuadrado I, Hortelano S, de-las-Heras B (2018) Molecular basis for the pharmacological activity of terpenes. Actas del III Congreso de Señalización Celular, SECUAH 2018. 20-22 de marzo, 2018. Universidad de Alcalá. Alcalá de Henares, Madrid. España. Sesión de paneles. dianas 7 (1): e201803. ISSN 1886-8746 (electronic) journal.dianas.e201803. URI http://hdl.handle.net/10017/15181

Copyright: ©2018 González-Cofrade L, Cuadrado I, Hortelano S, de-las-Heras B. Some rights reserved. Este es un artículo open-access distribuido bajo los términos de una licencia de Creative Commons Reconocimiento-NoComercial-SinObraDerivada 4.0 Internacional. http://creativecommons.org/licenses/by-nc-nd/4.0/

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dianas 7 (1) Asenjo-Bueno etal 2018 Efecto de la hiperfosfatemia en la génesis de fibrosis vascular en el envejecimiento

SECUAH 2018 > Asenjo-Bueno etal 2018

dianas | Vol 7 No 1 | 2018 | e201803b11

Efecto de la hiperfosfatemia en la génesis de fibrosis vascular en el envejecimiento

1. Servicio de Nefrología y Fundación para la Investigación Biomédica del Hospital Universitario Príncipe de Asturias, Alcalá de Henares, España.  2. Departamento de Biología de Sistemas, Universidad de Alcalá, Alcalá de Henares, España.  3. Red Renal (REDinREN), Instituto de Salud Carlos III, Madrid, España.  4. Instituto Reina Sofía de Investigación Renal (IRISIN), Madrid, España. 

a. luaasbu19@gmail.com 

III Congreso de Señalización Celular, SECUAH 2018.
20-22 de marzo, 2018. Universidad de Alcalá. Alcalá de Henares, Madrid. España.
Sesión

Resumen

INTRODUCCIÓN Y OBJETIVO. La hiperfosfatemia aparece secundariamente en los pacientes con enfermedad renal crónica, que presentan complicaciones cardiovasculares asociadas a mayor mortalidad y signos de envejecimiento prematuro. Este estudio plantea establecer la relación entre hiperfosfatemia, envejecimiento y eventos cardiovasculares, evaluando concretamente el desarrollo de fibrosis vascular. MATERIALES Y METODOS. Para ello, se tratan dos tipos celulares básicos en la estructura vascular, células endoteliales (CE) y células musculares lisas (CML) humanas con un donador de fosfato llamado beta-glicerofosfato (BGP), a distintos tiempos. La producción de ROS se analizó por microscopia confocal mediante una sonda fluorescente CellROX. Para los estudios in vivo se utilizaron ratones C57/BL6 jóvenes de 5 meses y viejos de 24 meses. La fibrosis se estudió por la expresión de TGF-ß y fibronectina-1 (FN) por western blot, tanto en células como en tejidos vasculares, y por la tinción de rojo sirio en tejidos. Los niveles de fósforo séricos en ratones fueron determinados por métodos colorimétricos. RESULTADOS. El tratamiento con BGP en CE y CML indujo un aumento en ambas proteínas fibróticas, TGF-ß y FN. Además, se comprobó que el BGP era capaz de aumentar la producción de radicales libres (ROS) a tiempos cortos. Así mismo, se pudo observar que el antioxidante N-Acetil cisteina (NAC) bloqueó los efectos del BGP, sugiriendo que los ROS estaban implicados en la fibrosis inducida por BGP en las células. Se realizaron estudios in vivo en ratones jóvenes y viejos para corroborar los resultados encontrados in Vitro. Los ratones viejos poseían niveles mayores de fósforo sérico respecto a los jóvenes. En general, los ratones viejos presentan mayor grado de fibrosis en diferentes tejidos vasculares como aorta, pulmón y corazón; que fue medida mediante expresión proteica de FN, TGF-ß y por tinción de las fibras de colágeno con Rojo Sirio. DISCUSION. En resumen, podemos concluir que existe una relación entre el envejecimiento y la hiperfosfatemia, siendo ésta una de las posibles causas del desarrollo de fibrosis vascular. Uno de los mecanismos implicados podría ser la mayor producción de ROS por parte del BGP, pero más estudios son necesarios.

Cita: Asenjo-Bueno A, Sosa P, Alcalde-Estévez E, Serrano-García L, Plaza P, Rodríguez-Puyol D, Olmos G, Ruíz-Torres MP, López-Ongil S (2018) Efecto de la hiperfosfatemia en la génesis de fibrosis vascular en el envejecimiento. Actas del III Congreso de Señalización Celular, SECUAH 2018. 20-22 de marzo, 2018. Universidad de Alcalá. Alcalá de Henares, Madrid. España. Sesión. dianas 7 (1): e201803b11. ISSN 1886-8746 (electronic) journal.dianas.e201803b11. URI http://hdl.handle.net/10017/15181

Copyright: ©2018 Asenjo-Bueno A, Sosa P, Alcalde-Estévez E, Serrano-García L, Plaza P, Rodríguez-Puyol D, Olmos G, Ruíz-Torres MP, López-Ongil S. Some rights reserved. Este es un artículo open-access distribuido bajo los términos de una licencia de Creative Commons Reconocimiento-NoComercial-SinObraDerivada 4.0 Internacional. http://creativecommons.org/licenses/by-nc-nd/4.0/

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dianas 7 (1) Alcalde-Estévez etal 2018 La endotelina 1 induce fibrosis en células de músculo estriado de ratón

SECUAH 2018 > Alcalde-Estévez etal 2018

dianas | Vol 7 No 1 | 2018 | e201803b13

La endotelina 1 induce fibrosis en células de músculo estriado de ratón

1. Departamento de Biología de Sistemas, Universidad de Alcalá, Alcalá de Henares, España.  2. Servicio de Nefrología y Fundación para la Investigación Biomédica del Hospital Universitario Príncipe de Asturias, Alcalá de Henares, España.  3. Red Renal (REDinREN), Instituto de Salud Carlos III, Madrid, España.  4. Instituto Reina Sofía de Investigación Renal (IRISIN), Madrid, España. 

a. elena_22_93@hotmail.com 

III Congreso de Señalización Celular, SECUAH 2018.
20-22 de marzo, 2018. Universidad de Alcalá. Alcalá de Henares, Madrid. España.
Sesión

Resumen

INTRODUCCIÓN Y OBJETIVO: El envejecimiento se caracteriza por un decline progresivo de las funciones fisiológicas de varios órganos y sistemas. Durante este proceso fisiológico del organismo, se ve alterado el equilibrio de la liberación y/o actividad de las sustancias secretadas por el endotelio, entre las que se encuentra la endotelina 1 (ET-1). La ET-1 es el péptido vasoconstrictor más potente conocido hasta la fecha y se ha descrito que contribuye al desarrollo de fibrosis tisular en distintos tipos celulares. En resultados previos de nuestro grupo de investigación, se ha descrito un incremento de la presencia de fibrosis en el músculo estriado de ratones envejecidos, así como de los niveles de ET-1 circulantes en plasma, en comparación con sus controles jóvenes. Además, se demostró la presencia de receptores para la ET-1 en células murinas de músculo esquelético en cultivo. Por todo ello, el objetivo de este estudio es examinar si la ET-1 puede causar directamente fibrosis en células de músculo esquelético, analizando la expresión de factores fibrogénicos en el cultivo de mioblastos murinos. MATERIALES Y MÉTODOS: Se realizaron experimentos en mioblastos de ratón C2C12 en presencia y ausencia de ET-1 a diferentes tiempos, estudiándose su efecto sobre la expresión de proteínas fibróticas, así como los posibles mecanismos implicados en dicha expresión mediante la administración de diversos inhibidores. El desarrollo de fibrosis se analizó mediante la medición de proteínas fibróticas como fibronectina (FN) y el factor de crecimiento transformante beta (TGF-β) con las técnicas de western-blot, inmunofluorescencia, RT-qPCR y ELISA. RESULTADOS: La ET-1 induce fibrosis en mioblastos al aumentar la producción de TGF-β y de FN. Los ensayos con antagonistas específicos de los receptores de ET-1, ETA (BQ123) Y ETB (BQ788) confirmaron que el efecto de la ET-1 era mediado por la unión a su receptor ETA y no al receptor ETB. Está descrito que la ET-1 vía receptor ETA activa la vía PI3K-AKT-GSK, que interviene en distintas respuestas celulares. Con el fin de estudiar el mecanismo de acción de la ET-1 sobre la respuesta fibrótica en mioblastos, se demostró la participación de dicha vía mediante la administración de diferentes inhibidores farmacológicos de dicha vía. Además, también se comprobó el papel de la producción de radicales libres (ROS) inducida por ET-1 en la expresión de factores fibróticos mediante la incubación de mioblastos en presencia de antioxidantes (N-acetilcisteína y DPI), observándose que el desarrollo de fibrosis se veía reducido cuando se administraban dichos antioxidantes. DISCUSIÓN: Por tanto, podemos concluir que la ET-1 a través de su receptor ETA posee un efecto directo sobre fibrogénesis en el cultivo de mioblastos mediado por la vía de PI3K-AKT-GSK y la producción de radicales libres. Estos resultados nos sugieren que el aumento de la ET-1 circulante observado durante el envejecimiento sería uno de los factores que influyen en el desarrollo fibrosis en el músculo esquelético.

Cita: Alcalde-Estévez E, Asenjo-Bueno A, Sosa P, Plaza P, Serrano L, Rodríguez-Puyol D, Olmos G, Ruíz-Torres MP, López-Ongil S (2018) La endotelina 1 induce fibrosis en células de músculo estriado de ratón. Actas del III Congreso de Señalización Celular, SECUAH 2018. 20-22 de marzo, 2018. Universidad de Alcalá. Alcalá de Henares, Madrid. España. Sesión. dianas 7 (1): e201803b13. ISSN 1886-8746 (electronic) journal.dianas.e201803b13. URI http://hdl.handle.net/10017/15181

Copyright: ©2018 Alcalde-Estévez E, Asenjo-Bueno A, Sosa P, Plaza P, Serrano L, Rodríguez-Puyol D, Olmos G, Ruíz-Torres MP, López-Ongil S. Some rights reserved. Este es un artículo open-access distribuido bajo los términos de una licencia de Creative Commons Reconocimiento-NoComercial-SinObraDerivada 4.0 Internacional. http://creativecommons.org/licenses/by-nc-nd/4.0/

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dianas 7 (1) López-Llorente and Jorcano-Noval 2018 Detección y caracterización de interacciones físicas y moleculares en cultivos celulares 3D.

SECUAH 2018 > López-Llorente and Jorcano-Noval 2018

dianas | Vol 7 No 1 | 2018 | e201803a31

Detección y caracterización de interacciones físicas y moleculares en cultivos celulares 3D.

Centro de Investigaciones Energéticas, Medioambientales y Tecnológicas (CIEMAT). Dirección Completa. Avenida Complutense, 40 (Madrid).España. Email: . Universidad Carlos III de Madrid, Avenida de la Universidad 30, Leganés (Madrid). España. Dpto.Biología de Sistemas, Universidad de Alcalá de Henares (Madrid), España.

veronica.lopez.llorente@gmail.com, veronica.lopez.llorente@gmail.com; veronica.lopez@ciemat.es

III Congreso de Señalización Celular, SECUAH 2018.
20-22 de marzo, 2018. Universidad de Alcalá. Alcalá de Henares, Madrid. España.
Sesión A3 – Biología y Tecnología Celular

Resumen

INTRODUCCIÓN Y OBJETIVOS: Además de las señales bioquímicas, factores de crecimiento, hormonas, citoquinas y una compleja red de señalización celular que se encargan de regular procesos de proliferación, diferenciación y migración celular, así como de apoptosis, también se conoce que factores extrínsecos como fuerzas de tracción célula-célula y matriz- célula regulan el comportamiento celular. En tejidos biológicos vivos, estas fuerzas inter e intracelulares son esenciales para mantener la estructura y función del tejido y tienen una gran relevancia en el mantenimiento de la homeostasis (DuFort et al. 2011). La capacidad de las células para integrar esta información mecánica (mecanotransducción) también tiene un papel central en un amplio rango de procesos biológicos y se ha demostrado que tiene implicaciones importantes durante el desarrollo tisular y en el comienzo y progresión de muchas enfermedades (Orr et al. 2006, Ingber 2006). Sin embargo los mecanismos moleculares desencadenados por las respuestas bioquímicas de estas fuerzas mecánicas aún no se conocen bien, debido a la falta de métodos adecuados para medir estas fuerzas intercelulares con una alta resolución espacial y temporal. Por este motivo, el objetivo principal de mi trabajo es desarrollar una nueva metodología experimental para medir la evolución espacio-temporal de las fuerzas intercelulares en tejidos tridimensionales, en concreto durante la morfogénesis epidérmica, mediante experimentos de cell tracking y medición de fuerzas celulares. MÉTODOS: Estos estudios se realizan sobre cultivos organotípicos tridimensionales generados in vitro a partir de queratinocitos y fibroblastos obtenidos de biopsias humanas mediante digestión enzimática y plasma humano procedente de voluntarios sanos. Para los experimentos de cell tracking, dos poblaciones de queratinocitos se transducen para que expresen H2B-GFP y H2B-mCherry respectivamente, de manera que somos capaces de crear una piel in vitro en la que un porcentaje elevado de queratinocitos expresan GFP en su núcleo y alrededor de un 3% de queratinocitos expresan mCherry, lo que facilita la tarea de reconocimiento de los grupos celulares de la membrana basal que van a ser visualizados mediante microscopía confocal a diferentes tiempos durante el proceso formación del epitelio. Para los experimentos de medición de fuerzas, se utiliza un microrod (varilla) de fibra de carbono que es posicionado en la muestra en el momento del inicio de la diferenciación epidérmica. Así, cuando las células comienzan a formar las distintas capas de la epidermis, esta varilla se deforma. Conociendo las propiedades físicas de la fibra de carbono, somos capaces de calcular las fuerzas que están ejerciendo las células a partir de la deformación que han originado las mismas sobre la varilla mediante el análisis de las imágenes obtenidas por microscopía confocal. Además, también se ha incluido en los experimentos, la validación de los resultados obtenidos de la medición de fuerzas a través del método propuesto, mediante la utilización de microscopía de fuerza atómica. El reto que plantean estos estudios es principalmente la inestabilidad de la matriz tridimensional de fibrina que actúa como dermis sustentando el sistema sobre el que se realizan las medidas, ya que se trata de una estructura dinámica que sufre remodelaciones y cambios en su composición a lo largo de los 21 días necesarios para la diferenciación completa de la piel. Por este motivo, como parte de los objetivos del proyecto, se está trabajando en la mejora y optimización de la matriz 3D, mediante la inclusión de nuevos biomateriales naturalmente presentes en la piel.

Cita: López-Llorente V, Jorcano-Noval JL (2018) Detección y caracterización de interacciones físicas y moleculares en cultivos celulares 3D. Actas del III Congreso de Señalización Celular, SECUAH 2018. 20-22 de marzo, 2018. Universidad de Alcalá. Alcalá de Henares, Madrid. España. Sesión A3 – Biología y Tecnología Celular. dianas 7 (1): e201803a31. ISSN 1886-8746 (electronic) journal.dianas.e201803a31. URI http://hdl.handle.net/10017/15181

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