SECUAH 2021

dianas | Vol 8 No 1 | marzo 2019 | e201903

Hipersensibilidad dental: estudios experimentales en ratón

Laura Bernal, Pamela Sotelo-Hitschfeld, Carolina Roza, Katharina Zimmermann

Departamento de Biología de Sistemas, Universidad de Alcalá. 28871, Alcalá de Henares, Madrid, España.

laura.bernal@uah.es

IV Congreso de Señalización Celular, SECUAH 2019.
20-22 de marzo, 2019. Universidad de Alcalá. Alcalá de Henares, Madrid. España.

Palabras clave: aferencia dental; hipersensibilidad dental; frío; mentol

Resumen

El dolor dental, especialmente la hipersensibilidad dental, es un problema clínico y social con alta prevalencia. Su fisiopatología se desconoce y no hay tratamiento para los pacientes, que se quejan de dolor en respuesta a la estimulación con frío. En el sistema nervioso somático se han identificado diferentes canales de potencial receptor transitorio (TRP) como transductores de frío (Julius D. 2013). Estos canales también están presentes ganglios trigeminales humanos y de roedores (Hermanstyne TO et al. 2008), lo que sugiere que podrían tener un papel en la transducción de frío en aferencias primarias dentales (APD). Adaptamos la preparación mandíbula-nervio para realizar registros electrofisiológicos de APD en ratón. La actividad eléctrica de las fibras sensoriales se registró mediante microelectrodos de succión, y se aplicaron estímulos de frío. En algunas fibras sensibles al frío, se aplicó mentol (100 µM). Además, los cuerpos celulares de las neuronas APD se identificaron mediante marcaje retrógrado, basándose en la aplicación DiI en una cavidad perforada en los molares. Tras 5 días, se extrajeron los ganglios trigéminos y se realizó cultivo primario. Las células se cargaron con Fura2AM y se sometieron a mediciones ratiométricas de calcio. Registros electrofisiológicos en dientes intactos de ratón C57BL/6J mostraron una incidencia del 3% de fibras sensibles al frío (n = 2/68), la cual aumentó hasta el 10% (29/300) tras exponer la pulpa dental. Registros en ratones TRPM8-/- mostraron una reducción del número de fibras sensibles al frío a ~6% (5/81), sin diferencias en ninguno de los parámetros analizados. La perfusión de mentol en ratones wildtype (17/31), provocó en dos casos una respuesta excitadora; su combinación con frío potencio la respuesta en 4 fibras. En conjunto, el 35% (6/17) de las fibras sensibles al frío se definieron como mentol-sensitivas. De modo similar, los experimentos de imagen de calcio identificaron el 13% de las APD marcadas en ratones C57BL/6J eran sensibles al frío (11/86), respondieron el 70% de ellas a la aplicación de mentol 500 μM (a 25 ºC). Estos resultados indican que TRPM8 mantiene un papel en la transducción en frío en el diente, pero no puede ser el único canal de transducción de frío. La combinación de una preparación ex vivo con estudios de sus cuerpos celulares permite investigar la especialización molecular de los nociceptores de pulpa dental tanto a nivel celular como de sistema sensorial intacto.